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      玻片的準備和樣品固定

      文章發布日期:2014-05-05 21:34:51

      電熱鼓風干燥箱對于染色體涂片,1:1的乙醇/醚處理的載玻片已能符合要求。對于組織切片的原位雜交,為了在實驗過程中不丟失組織樣品,可使用多聚賴氨酸或鉻礬明膠包被的載玻片。

      樣品的固定步驟是為了保持樣品的原有形態學。樣品固定是原位雜交中必不可少的步驟,從化學反應角度來看,固定劑的使用和選擇對后續雜交的影響不會太大,因為核酸雜交的功能分子基團被安全地包裹在DNA雙螺旋結構中,而交聯劑的使用對RNA基本沒有影響。對于染色體涂片,常使用甲醇/醋酸溶液固定;石蠟包埋的組織切片用福爾馬林固定。冷凍切片可通過在4%的甲醛溶液中固定30min,或使用Bouin固定劑。

       
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